产品简介
基因组denovo测序是指不参考任何已有的DNA序列信息,直接对某物种的基因组进行测序,也叫做从头测序。首先需获取某物种高质量DNA样本,评估基因组特征,选择合适的测序策略和组装方法,将测序得到的长reads进行拼接,然后利用其他技术进行辅助排序、定相,从而获得物种完整的基因组序列图谱。
技术流程
基因组测序策略
测序技术 |
测序深度 |
作用 |
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二代测序 |
≥50X |
基因组特征评估、基因组去杂合 |
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三代PacBio CCS测序 |
两种技术二选一 |
基因组组装 |
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三代Nanopore测序 |
≥100X |
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Hi-C技术 |
染色体挂载 |
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二代转录组 |
基因组注释 |
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三代全长转录组 |
≥20G |
基因组样品准备
样品类型 |
样品量要求 |
样品状态 |
注意事项 |
植物组织 |
取新鲜幼嫩叶片/芽 |
取样注意清洁,避免污染 |
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Hi-C≥2g/样 |
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动物组织 |
三代≥2g/文库 |
取鲜活核酸含量高组织 |
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Hi-C≥2g/样 |
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血液 |
三代≥10ml/文库 |
全血样本,加入抗凝剂EDTA |
避免反复冻融 |
Hi-C细胞量≥2.0×106/次 |
需提供分离并固定好的淋巴细胞 |
结果展示
基因组特征分析
比较基因组学分析
经典案例
物种 |
样本情况 |
发表期刊 |
年份 |
研究内容 |
燕麦[1] |
3个基因组,栽培燕麦(AACCDD)、其近亲二倍体(AA)和四倍体(CCDD) |
Nature |
2022年 |
完成六倍体燕麦基因组组装,探讨燕麦亚基因组结构变异和功能进化。 |
番木瓜[2] |
2个基因组,转基因品种SunUp和非转基因品种Sunset+86份群体材料 |
Nature Genetics |
2022年 |
获得2个番木瓜高质量基因组,首次研究了基因枪介导的转基因过程对基因组结构和功能的影响,及番木瓜起源和驯化。 |
海大麦[3] |
1个基因组 |
Plant Communications |
2022年 |
完成了小麦族盐生植物海大麦的基因组,解析其耐盐机制,并构建海大麦的高效基因编辑体系。 |
参考文献
[1] Nadia Kamal, Nikos Tsardakas Renhuldt, Johan Bentzer, et al. The mosaic oat genome gives insights into a uniquely healthy cereal crop. Nature 606, 113–119 (2022).
[2] Jingjing Yue, Robert VanBuren, Juan Liu, et al. SunUp and Sunset genomes revealed impact of particle bombardment mediated transformation and domestication history in papaya. Nat Genet 54, 715–724 (2022).
[3] Liuhui Kuang, Qiufang Shen, Liyang Chen, et al. The genome and gene editing system of sea barleygrass provide a novel platform for cereal domestication and stress tolerance studies. Plant Communications,2022,100333,ISSN 2590-3462.